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HPLC质量肽图

HPLC质量肽图分析是蛋白质一级结构研究中极为重要的手段之一,不但可以比较重组与天然蛋白质结果之间的同一性,确认基因工程上游和下游处理过程中是否发生差错、重组产物中是否存在后转译化学修饰及未预期氨基酸的变异等,而且不同批次产品的肽谱比较可验证工艺过程的稳定性。因此,肽谱分析在基因工程产品质控中尤为重要。

试品经酶解后进入HPLC,根据肽段不同保留时间进行分离,洗脱下来的肽段进入质谱进行检测。根据质谱检测器采集的质谱结果和数据分析软件,可以确认HPLC质量肽图中紫外吸收峰所对应的肽段。

ICH Q6B要求提供质量肽谱图确认氨基酸序列。

实验仪器

1) 高分辨质谱仪:XevoG2-XS QTof (Waters公司)

2) 超高效液相色谱:UPLC (Acquity UPLC-Class) (Waters公司)

分析内容

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